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羅丹明123使用方法流程是怎樣的
瀏覽次數:86發布日期:2021-12-03
  羅丹明123是一種可以通過細胞膜的選擇性染色活細胞線粒體的熒光染料,呈黃綠色熒光,多用于檢測線粒體膜電位,也常用于細胞凋亡檢測。它可以快速通過細胞膜,僅需幾分鐘就可以被具有活性的線粒體所俘獲,并且對細胞沒有任何毒性。

  羅丹明是一種具有鮮桃紅色的人工合成的染料。一般用作實驗室中細胞熒光染色劑,是一種具有鮮桃紅色的人工合成的工業染料。染料是一種深紅色近紅外熒光染料、細胞滲透性強、高特異性的DNA探針。具有優異光物理性質,在保留了熒光染料優越的光學性質的同時,光譜發生明顯紅移,滿足了近紅外熒光檢測的要求,具有良好的生物相容性,其激發波通常長大于600nm,發射波長位于近紅外區約680nm,相對于傳統的近紅外菁染料,具有較好的光穩定性,在生物成像時能夠獲得穩定持久的熒光信號,能夠應用于長時間熒光成像進程。更是堿性熒光染料,作為熒光試劑已被廣泛用于食品、環保、礦業和鋼鐵等領域。

  羅丹明123使用方法流程:
  1. 用載玻片準備細胞。細胞數目應為 5×104~5×105個/mL。
  2. 孵育該載玻片,用 PBS或Hank’s 液洗滌細胞。
  3. 用培養基稀釋 Rh123母液以制備 1~20?M Rh123緩沖液。具體工作濃度取決于細胞類型和細胞濃度。
  4. 將 Rh123緩沖液加入載玻片并在37℃下孵育 30 分鐘至 1 小時。
  5. 去除 Rh123 緩沖液并用培養基洗滌細胞(洗滌細胞后為了固定,加入 10%福爾馬林緩沖液并孵育 15~20 分鐘,接著用 PBS洗滌)。
  6. 用帶有熒光素濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。
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